HE染色流程是什么,很多人都不知道,今天跟着小编一起来学习一下,切片的好坏直接影响疾病诊断的及时与准确性。因此一张高质量的HE染色切片,是实验室必须掌握的技术之一。HE染色目前在国内国外病理诊断上被
广泛采用,常规的染色方法。下面一起来看HE染色的基本顺序。一般切片的片子应在60-70度左右的烤箱中烘烤30分钟以才可以进行染色。总的来说是一个时间较长的过程。
1.样品制备
对于贴壁生长细胞,胰酶消化,调整细胞浓度约1×105/ml,滴加于盖玻片上(置于6孔板中),培养相应时间后,取出细胞爬片,用PBS 洗涤3次。2.样品固定 95%乙醇固定20min,PBS洗涤2次,每次1min。3.染核 苏mu
素染液染色2-3min,自来水洗涤。4.分色 镜下观察,若细胞核染色过深,用1%盐酸酒精溶液分色数秒,自来水洗涤。 5.染胞质 浸入伊红染液染色1min,自来水洗涤。6.封片 吹干或自然晾gan细胞爬片后,中性树胶封片。
以上六点就是HE染色的基本步骤,大家可以参考一下哦







石蜡切片制作流程1.取材:取材必须新鲜,切取材料时刀要锐利避免挤压组织,一般厚度不超过2mm,大小不超过5×5mm2,取后立即投入固定液。
2.固定:固定剂为组织块体积的10~15倍,一般为4%的中性多聚甲醛,固定时长24小时。
3.脱水:70%酒精→85%酒精→90%酒精→95%酒精→无水乙醇Ⅰ→无水乙醇Ⅱ(不同组织脱水时间不同)
4.透明:透明剂能同时与脱水剂和石蜡混合,它取代了脱水剂后,石蜡便能顺利地渗入组织
贴片:切好的切片必须贴附于载玻片上才能作进一步处理,但是切片常有细小的横纹,必须经展平后才能贴附,否则影响染色和观察。首先将连串的切片投入到44℃左右(视蜡的熔点而定,此温度适合熔点为59℃左右的石蜡)的温水浴中,这时切片都浮在水面上,由于表面张力的作用使切片自然展平,用镊子将切片分开,然后用防脱玻片倾斜着插入水面去捞取切片,使切片贴附在载玻片的合适位置,于60℃ 烤箱烤片2个小时即可。